非動物性蛋白腖增強腺病毒產生
腺病毒載體已用於多種應用,包括疫苗遞送和基因治療。為了提高可靠性、一致性和安全性並優化生產,全球製造商和監管機構正在逐漸不再在其製程中使用動物血清。然而完全化學成分確定的(CD)培養基和補料通常會影響滴度目標,從而提高製造成本。
蛋白腖(或蛋白質水解產物)由水溶性產物組成,包括勝肽片段和源自植物、酵母或動物組織蛋白質部分水解的各種其他營養成分。可以透過在細胞培養基中補充蛋白腖來改進上游生產過程,特別是在無血清培養基中。
先前,研究證明了在 Gibco Dynamis 培養基中懸浮 HEK293 細胞生長和野生型腺病毒 5(AdV5)生產透過額外的 EfficientFeed C+ 2X 補料實現了高病毒滴度。在此研究中,評估了各種非動物性 (AOF) 蛋白腖(大豆、酵母、棉花和麥芽)對 Ambr15 微生物反應器中 AdV 產生的影響。透過病灶形成測定對病毒滴度進行定量。
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結果表明,所有感染 AdV5 的培養物的細胞密度和細胞活力在感染後 2 至 6 天(dpi)期間均下降。在大多數情況下,在 0 和 2 dpi 時添加 2g/L 或 6g/L 蛋白腖(在 3 dpi 時溫度下降)會在 4 或 5 dpi 時產生峰值 AdV 滴度。雖然幾種蛋白腖條件(大豆、酵母和棉花)中的病毒峰值滴度與 CD 條件下的滴度相匹配,但兩種蛋白腖混合條件下的滴度增加了約 40%。
總的來說,這些結果顯示 AOF 蛋白腖可以有效增強腺病毒的產生。 AOF 蛋白腖可以成為補料分批製程中基於病毒載體的生產的經濟且高效的替代品。
資料來源:ECI Symposium